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半河果蝇系 (“一分为二”)

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半河果蝇系 (“一分为二”)

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关于 GAL4 分半飞行线

将转基因可重复靶向表达到小的、确定的细胞亚群的能力是理解许多生物过程的关键实验工具。果蝇神经系统有成千上万种不同的细胞类型,通常不可能将表达限制在一个或几个具有标准飞行线的细胞类型。交叉方法可以通过仅在两个不同增强子在其表达模式中重叠的情况下允许转基因的表达来实现所需的特异性。

在最近发表的一项研究中,鲁宾实验室和 FlyLight 项目团队的 Janelia 研究人员极大地扩展了研究人员使用这些交叉方法进行定制果蝇电路分析的能力。他们创造了约 7,500 个 “hemidriver” 果蝇飞行线,允许产生细胞类型特定的 split-GAL4 驱动线。这些苍蝇可以通过布卢明顿证券中心通过美国国立卫生研究院的资助,在 Janelia Drosophila Resources 的大规模协调努力下。

Janelia 的研究人员使用了 split-GAL4 交叉方法,如Luan 等人 (2006)中描述的优化向量Pfeiffer 等人 (2010)。结果是带有单个增强剂的飞线驱动 gal4 的 DNA 结合域 (DBD) 或与亮氨酸拉链二聚化域相连的激活域 (AD) 的表达。当单独表达时,每一半不足以激活上游激活序列 (UAS) 报告基因的转录。当 AD 和 DBD 都存在于同一个细胞中时,它们结合形成一个功能性转录因子,该转录因子可以结合 gal4 的同源 UAS DNA 序列的串联阵列并激活转录。由此产生的转基因 “hemidriver” 线表达 p65 AD 或 GAL4 DBD 结构域在增强子的控制下从收集描述Jenett 等人 (2012)被创造出来。使用本研究中描述的组合 hemidriver 集合和Tirian 等人 (2017)因此,有可能在成年苍蝇大脑中获得超过四分之三的细胞类型的有用的 split-GAL4。

机会

半河果蝇系可从布鲁明顿

主要 split-GAL4 页面


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迈克尔 · 佩勒姆
创新管理主管
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