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FIB-SEM技术

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研究野心
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我们旨在超越聚焦离子束扫描电子显微镜(FIB-SEM)技术的局限性,以实现大容量[1.0],高吞吐量[2.0]和无伪影[3.0],等距离高分辨率3D成像。金博宝188登录

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增强的fib-sem 1.0:启用大容量高分辨率3D成像,可用于金博宝188登录开放科学

大量大量的各向同性高分辨率成像为推进连接组学和细胞生金博宝188登录物学研究提供了前所未有的机会。常规聚焦离子束扫描电子显微镜(FIB-SEM)提供了独特的好处,例如高分辨率(X,Y和Z中的<10 nm),最小缺陷和可靠的图像对齐,非常适合于神经元过程的出色跟踪和自动化的效果分割。但是,它在成像速度和持续时间盖上的普遍缺陷是最大可能的图像量。金博宝188登录我们开发了创新的解决方案来克服这些障碍,并从缺乏长期可靠性的常规实验室工具转换为能够在最终图像堆栈中没有缺陷的多年连续成像的强大成像平台[金博宝188登录Xu等。2017;Xu等。2020a;Xu等。2020b]。

这些改进使连续成像体积的扩展超过四个数量级,从10个数量级以上3µm3至少107µm3,同时保持8 x 8 x 8 nm的各向同性采样3体素。此外,通过交易成像速度,系统可以轻松以更高的分辨率金博宝188登录运行,以达到4 x 4 x 4 nm的体素尺寸3。通过这种增强的FIB-SEM技术启用了扩展的量1.0,在科学学习中实现了巨大的新制度,其中纳米量表分辨率与中索甚至宏尺度量相结合至关重要。迄今为止最大的连接组已经通过这个增强的FIB-SEM平台生成[Xu等。2020c],上级Z分辨率赋予了神经元过程的自动追踪,并减少了耗时的人类校对工作。增强的FIB-SEM开发和果蝇努力的努力在自然纽约时报

果蝇通过13个热刀选项卡,由两个增强的FIB-SEM系统产生的半元素。

更高的分辨率进一步改善了对原本模棱两可的细节的解释。几乎所有细胞器都可以在4 x 4 x 4 nm处解决和分类。金博宝188登录3NM体素。我们使用这种方法来建立全细胞和组织的各向同性3D参考文献[Xu等。2021],并在Openorganelle[[Heinrich等。2021]。一起,这代表了高分辨率全细胞3D EM的新领域的开端,故事在自然科学家另外,通过与超分辨率荧光成像结合金博宝188登录CLEM应用通过标记见解释放细胞内细胞器鉴定的全部潜力。

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“我会要求您再次标记我们主题发展的相当典型的特征;如此之多的进展如何取决于技术,发现和新思想的相互作用,这可能是重要性下降的顺序。”

悉尼布伦纳
(1927-2019)

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